Hei acolo! Ca furnizor deCompuși de polihidroxi, Am o mulțime de cunoștințe despre aceste substanțe uimitoare și modalitățile de a le separa. Compușii de polihidroxi, care conțin mai multe grupuri de hidroxil (-OH), sunt utilizați pe scară largă în diferite industrii, de la produse farmaceutice la alimente și produse cosmetice. Deci, să ne scufundăm în metodele cromatografice pentru separarea acestor compuși.
Cromatografie lichidă (LC)
Cromatografia lichidă este una dintre cele mai utilizate tehnici pentru separarea compușilor de polihidroxi. Funcționează trecând o fază mobilă lichidă printr -o coloană ambalată cu o fază staționară. Diferitele componente din eșantion interacționează diferit cu faza staționară, determinându -le să elueze în momente diferite.
Cromatografie lichidă inversă - RPLC)
RPLC este super popular. În această metodă, faza staționară este non -polară, de obicei un material pe bază de silice legat cu grupări alchil cu lanț lung precum C18. Faza mobilă este un amestec de apă și un solvent organic, cum ar fi metanolul sau acetonitrilul. Compușii de polihidroxi, fiind polari datorită grupărilor hidroxil, interacționează cu faza mobilă mai mult decât faza staționară. Cu cât compusul este mai polar, cu atât se eluează mai repede din coloană.
Această metodă este excelentă, deoarece este relativ simplu de configurat și poate separa o gamă largă de compuși de polihidroxi. De exemplu, în analiza alcoolilor de zahăr (un tip de compus de polihidroxi), RPLC poate separa eficient diferiți alcoolici de zahăr pe baza structurilor și polarităților lor moleculare.
Cromatografie lichidă normală - fază (NPLC)
Spre deosebire de RPLC, NPLC folosește o fază staționară polară, cum ar fi silicagel și o fază mobilă non -polară, cum ar fi hexanul cu o cantitate mică de modificator polar precum izopropanolul. Compușii de polihidroxi au o afinitate mai puternică pentru faza staționară polară. Separarea se bazează pe diferențele dintre interacțiunile de hidrogen - legare și dipol - dipol între compuși și faza staționară.
NPLC este util atunci când aveți de -a face cu compuși de polihidroxi care nu sunt bine - separați de RPLC. De exemplu, unele steroizi de polihidroxi complexi pot fi mai bine separați folosind NPLC din cauza grupurilor funcționale polare specifice și a efectelor sterice.
Cromatografie cu gaz (GC)
Cromatografia cu gaz este un alt instrument puternic pentru separarea compușilor de polihidroxi, deși de obicei necesită o derivatizare a eșantionului. În GC, eșantionul este vaporizat și transportat printr -o coloană de un gaz inert (faza mobilă). Faza staționară este o peliculă subțire acoperită pe peretele interior al coloanei.
Derivatizare pentru GC
Deoarece compușii de polihidroxi au puncte de fierbere ridicate și volatilitate scăzută, trebuie să fie derivatizați pentru a le face potrivite pentru analiza GC. Metodele comune de derivatizare includ sililarea, acetilarea și metilarea. De exemplu, sililarea implică înlocuirea atomilor de hidrogen hidroxil cu grupe trimetilsilil (TMS). Acest lucru nu numai că crește volatilitatea compușilor de polihidroxi, dar și le îmbunătățește stabilitatea termică.
Odată derivatizați, compușii de polihidroxi pot fi separați pe baza presiunilor de vapori și a interacțiunilor lor cu faza staționară. GC poate oferi separații cu rezoluție ridicată și este adesea utilizat în analiza compușilor de polihidroxi cu molecule mici, cum ar fi zaharuri simple.
Ion - Chromatografie de schimb (IEC)
Cromatografia de schimb ion - se bazează pe schimbul de ioni între eșantion și faza staționară. Faza staționară conține grupuri funcționale încărcate, fie grupuri de schimb de cation (încărcat negativ), fie grupuri de schimb anionic (încărcat pozitiv).
Cation - Chromatografie de schimb
Pentru compușii de polihidroxi care pot forma cationi în anumite condiții, se poate utiliza cromatografia de schimb cation. De exemplu, unii acizi polihidroxi pot exista în formele lor ionice în soluție. Faza staționară are grupuri încărcate negativ, iar cationii de polihidroxi încărcați pozitiv sunt atrași de faza staționară. Separarea se bazează pe diferențele de densitate de încărcare și dimensiunea cationilor.
Anion - Schimbul de cromatografie
Pe de altă parte, dacă compușii de polihidroxi pot forma anioni, se aplică cromatografie anionică, anion. De exemplu, unii fosfați de zahăr sunt încărcați negativ în soluție. Faza staționară are grupuri încărcate pozitiv, iar anionii sunt păstrați pe coloană. Separarea depinde de puterea interacțiunii dintre anioni și faza staționară.
Mărime - Cromatografie de excludere (SEC)
Dimensiunea - Cromatografia de excludere, cunoscută și sub denumirea de cromatografie de filtrare gel - separă moleculele în funcție de dimensiunea și forma lor. Faza staționară este formată din perle poroase cu o distribuție definită a mărimii porilor.
Când un eșantion care conține compuși de polihidroxi este trecut prin coloană, moleculele mai mici pot intra în porii mărgelelor și au o cale mai lungă prin coloană, în timp ce moleculele mai mari sunt excluse din pori și eluează mai repede. Această metodă este utilă pentru separarea compușilor de polihidroxi pe baza greutăților lor moleculare, în special pentru polimeri sau oligomeri ai compușilor de polihidroxi.
Cromatografie de afinitate
Cromatografia de afinitate profită de interacțiunile specifice dintre un ligand imobilizat în faza staționară și compusul de polihidroxi țintă. De exemplu, dacă un compus polihidroxi are un situs de legare specific pentru o anumită proteină sau enzimă, proteina sau enzima corespunzătoare poate fi imobilizată în faza staționară.
Compusul de polihidroxi se va lega în mod specific de ligand în faza staționară, în timp ce alte componente din eșantion vor trece prin coloană. Apoi, schimbând condițiile precum pH -ul sau rezistența ionică a fazei mobile, compusul de polihidroxi legat poate fi eluat din coloană. Această metodă oferă o separare ridicată de selectivitate și este adesea utilizată în purificarea compușilor bioactivi de polihidroxi.
Considerente practice
Atunci când alegeți o metodă cromatografică pentru separarea compușilor de polihidroxi, trebuie să fie luați în considerare mai mulți factori. În primul rând, natura compușilor de polihidroxi înșiși, inclusiv greutatea moleculară, polaritatea, încărcarea și stabilitatea lor. În al doilea rând, matricea de probă, care poate conține alte substanțe care pot interfera cu separarea. În al treilea rând, sensibilitatea necesară și rezoluția analizei.
De exemplu, dacă aveți un eșantion biologic complex care conține o varietate de compuși de polihidroxi și alte biomolecule, poate fi necesară o combinație de metode cromatografice diferite. S -ar putea să începeți cu o metodă largă - de separare, cum ar fi dimensiunea - cromatografie de excludere pentru a fracționa eșantionul pe baza dimensiunii moleculare, apoi utilizați o metodă mai specifică, cum ar fi ionul - cromatografie de schimb sau cromatografie de afinitate pentru purificare suplimentară.
Concluzie
Ca furnizor deCompuși de polihidroxiȘtiu cât de important este să aveți metode de separare fiabile pentru acești compuși. Indiferent dacă sunteți cercetător într -un laborator, un analist de control al calității într -o fabrică sau cineva implicat în producerea de produse care utilizează compuși de polihidroxi, înțelegerea acestor metode cromatografice vă poate ajuta să obțineți rezultate exacte și produse de înaltă calitate.
Dacă vă intereseazăCompuși de polihidroxiSau aveți nevoie de mai multe informații despre separarea și analiza lor, nu ezitați să ajungeți. Suntem întotdeauna fericiți să discutăm nevoile dvs. și să oferim cele mai bune soluții. De asemenea, oferim produse conexe precumDerivate de tiofen de sensibilitate ridicată la luminăşiDerivați antrachinonepentru diverse aplicații. Contactați -ne pentru a începe o discuție despre achiziții și găsiți produsele potrivite pentru proiectele dvs.!
Referințe
- Snyder, LR, Kirkland, JJ, & Glajch, JL (2010). Dezvoltarea practică a metodei HPLC. John Wiley & Sons.
- McMaster, MC (2008). Cromatografie cu gaz și spectrometrie de masă: un ghid practic. John Wiley & Sons.
- Scopes, RK (1994). Purificarea proteinelor: principii și practică. Springer.